Ameba (czerwonka pełzakowata, Entamoeba histolytica) DNA w kale to nowoczesny, molekularny test diagnostyczny, który polega na wykrywaniu specyficznych fragmentów materiału genetycznego (DNA) pełzaka czerwonki (Entamoeba histolytica) bezpośrednio w pobranej próbce stolca. Poszukiwanie materiału genetycznego pełzaka czerwonki to bardzo czuła metoda laboratoryjna, która jednoznacznie może potwierdzić infekcję.
Entamoeba histolytica to patogen odpowiedziany za infekcję przewodu pokarmowego, która może mieć groźna dla zdrowia i życia skutki. W Polsce dotyczy przede wszystkim osób powracających z krajów tropikalnych lub ich bliskich.
Entamoeba histolytica to pierwotniak (pełzak) wywołujący czerwonkę. Do zakażenia patogenem dochodzi po spożyciu wody lub żywności - nieumyte owoce, warzywa - zamieszczonej cystami pierwotniaka.
Obserwowane objawy chorobowe to najczęściej:
- śluzowa biegunka, z możliwą domieszką krwi, spowodowana niszczeniem przez pasożyta nabłonka jelita grubego i powstającymi owrzodzeniami,
- nudności, ból brzucha, wzdęcia,
- gorączka lub stan podgorączkowy.
Choroba może prowadzić do zapalenia i ropnia wątroby.
UWAGA! Istnieje również czerwonka bakteryjna, wywoływana przez bakterie Shigella. Czerwonka bakteryjna i pełzakowata charakteryzują się podobnymi objawami, jednak diagnostyka obu rodzajów choroby jest odmienna.
W Polsce nie występuje pełzak czerwonki, miejscem jego naturalnego występowania są rejony strefy tropikalnej i subtropikalnej o niskim standardzie sanitarnym, dlatego choroba dotyczy zazwyczaj:
- osób przyjeżdżających z krajów Azji (m.in. Indie), Afryki Subsaharyjskiej, Ameryki Środkowej lub Południowej,
- domowników osób zakażonych, w tym bezobjawowych nosicieli - czerwonka to tzw. choroba brudnych rąk, dlatego możliwe nieświadome przeniesienie pasożyta na członków rodziny.
Wykrywanie materiału genetycznego pierwotniaka w kale jest badaniem umożliwiającym jego detekcję z wyjątkowo wysokim poziomem czułości i swoistości. Badanie odróżnia E. histolytica od identycznie wyglądającej, ale niegroźnej E. dispar, dając jednoznaczną informację czy źródłem zakażenia jest pełzak czerwonki i pacjent wymaga natychmiastowego leczenia.
Ameba (czerwonka pełzakowata, Entamoeba histolytica) DNA w kale - kto i kiedy powinien wykonać badanie?
Wskazania do wykrywania DNA pełzaka czerwonki (Entamoeba histolytica) w kale różnią się od wskazań do tradycyjnej mikroskopii. Wynika to z faktu, że badanie genetyczne może służyć do weryfikacji wątpliwych wyników oraz jako szybka diagnostyka pierwszego rzutu.
Weryfikacja i pogłębienie diagnostyki (najczęstsze wskazanie)
- Dodatni wynik badania mikroskopowego kału opisany jako "Entamoeba histolytica/dispar" - test genetyczny jest niezbędny, aby jednoznacznie zidentyfikować przyczynę infekcji i podjąć odpowiednie leczenie.
- Niejednoznaczny wynik innych testów (np. testów antygenowych ELISA), przy jednoczesnym utrzymywaniu się objawów klinicznych u pacjenta.
Objawy i wywiad medyczny
- Ostra lub przewlekła biegunka z krwią i śluzem, kurczowe bóle brzucha oraz gorączka u osób, które w ciągu ostatnich miesięcy podróżowały do krajów tropikalnych (Indie, Afryka, Ameryka Środkowa i Południowa).
- Niewyjaśnione objawy jelitowe u osób, które nie podróżowały, ale ich domownik lub partner seksualny wrócił z tropików (podejrzenie transmisji domowej).
- Podejrzenie pozajelitowej postaci amebozy (np. amebowego ropnia wątroby) - jako element kompleksowej diagnostyki obok badań obrazowych i serologicznych krwi.
Wskazania epidemiologiczne i profilaktyczne
- Badanie bliskich kontaktów (domowników) osoby z potwierdzonym zakażeniem E. histolytica - w celu szybkiego wykrycia bezobjawowego nosicielstwa w rodzinie (eliminuje potrzebę zbierania 3 próbek do badania mikroskopowego.
- Badania przesiewowe po powrocie z tropików u osób bezobjawowych, które pracują w zawodach o wysokim ryzyku transmisji (kucharze, personel medyczny, opiekunowie w żłobkach).
Ameba (czerwonka pełzakowata, Entamoeba histolytica) DNA w kale - normy i interpretacja wyników
Badanie genetyczne kału w kierunku ameby ma charakter jakościowy. Oznacza to, że jego celem jest stwierdzenie obecności lub braku materiału genetycznego (DNA) pasożyta.
- Norma: wynik ujemny (negatywny) / DNA nie wykryto.
- Wynik dodatni: Entamoeba histolytica - wykryto i potwierdzono obecność DNA chorobotwórczego pełzaka w przewodzie pokarmowym. Dalsze postępowanie zależy od stanu zdrowia pacjenta:
- u pacjenta z objawami (biegunka z krwią, skurcze) - wymagane natychmiastowe leczenia,
- u pacjenta bez objawów wynik potwierdza bezobjawowe nosicielstwo patogennego szczepu. Chory nadal musi przyjąć leki (działające w świetle jelita), aby zapobiec uaktywnieniu się choroby oraz zakażaniu swojej rodziny.
- Wynik niejednoznaczny: zdarza się sporadycznie i oznacza, że ilość DNA w próbce była na granicy mierzalności aparatu. Badanie należy powtórzyć z nowej próbki kału.
Ameba (czerwonka pełzakowata, Entamoeba histolytica) DNA w kale - przygotowanie do badania
Pomimo, że materiał genetyczny pierwotniaka jest stabilny, aby wyniki były wiarogodne należy przestrzegać kilku zasad.
- Przed pobraniem nie należy stosować czopków ani maści doodbytniczych.
- Do wypróżnienia należy użyć specjalnego podkładu na deskę sedesową lub wypróżnić się do czystego naczynia, ponieważ kał nie może mieć kontaktu z wodą z muszli ani detergentami.
- Opróżnić pęcherz moczowy, aby materiał do badania nie miał styczności z moczem, ponieważ związki w nim zawarte mogę utrudniać analizę.
- Próbkę trzeba pobrać z kilku miejsc za pomocą łopatki dołączonej do pojemnika. Wystarczą 2-3 małe porcje z 2-3 różnych punktów stolca (łącznie ilość wielkości orzecha laskowego lub włoskiego).
- Jeśli w kale widoczne są fragmenty ze śluzem, ropą lub krwią, próbkę należy pobrać przede wszystkim z tych miejsc, koncentracja pierwotniaka w tych miejscach jest największa.
- Materiał należy od razu dostarczyć do laboratorium, a jeśli nie jest to możliwe do tego czasu przechować w temp. 2-8 °C - w lodówce.
Co może wpłynąć na wynik badania?
Na wynik badania mogą mieć wpływ przyjmowanie leki, dlatego nie należy go wykonywać trakcie przyjmowania antybiotyków oraz leków przeciwpasożytniczych (odrobaczających). Należy odczekać minimum 2-3 tygodnie od zakończenia takiego leczenia.